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圓二色發(fā)光光譜儀是重要的生物分子結(jié)構(gòu)分析工具

更新時(shí)間:2023-05-31      點(diǎn)擊次數(shù):335
  圓二色發(fā)光光譜儀 (Circular Dichroism Spectrometer, CD) 是一種重要的生物分子結(jié)構(gòu)分析工具,可用于分析蛋白質(zhì)、核酸等生物分子的三級(jí)和四級(jí)結(jié)構(gòu)以及與其他分子間相互作用。通過(guò)閃耀紫外或可見(jiàn)光源,樣品中的生物分子分子能量激發(fā)到高能態(tài)的電子云中。然后受激電子回到基態(tài)時(shí)會(huì)放出不同方向的光,即沿著電磁波S方向和P方向旋轉(zhuǎn)線偏振分解器的平面旋轉(zhuǎn)的兩個(gè)偏振光(circulating light)。由于分子各自的結(jié)構(gòu),使得分子對(duì)S和P的偏振光強(qiáng)度吸收不同,是正性或反性旋轉(zhuǎn)的。
 
  圓二色發(fā)光光譜儀主要由激光光源、偏振器、樣品室、光譜儀等組成:
 
  激光光源:采用的是紫外或藍(lán)色激光光源,用于激發(fā)熒光分子產(chǎn)生圓偏振發(fā)光。
 
  偏振器:主要用于產(chǎn)生線偏振激光,使其與樣品發(fā)生相互作用,從而產(chǎn)生圓二色發(fā)光現(xiàn)象。
 
  樣品室:是放置樣品的空間,它包括樣品支架、樣品旋轉(zhuǎn)臺(tái)、溫度控制系統(tǒng)等。在樣品室中,通過(guò)對(duì)樣品進(jìn)行旋轉(zhuǎn)、加熱等處理,可以獲得樣品的圓二色發(fā)光光譜信息。
 
  光譜儀:采用高分辨率的光譜儀,用于分析樣品發(fā)出的圓二色發(fā)光光譜信號(hào)。光譜儀將樣品發(fā)出的光信號(hào)分解為不同波長(zhǎng)的光譜成分,并通過(guò)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)對(duì)光譜信號(hào)進(jìn)行處理和分析。
 
  圓二色發(fā)光光譜儀廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、分子生物學(xué)、藥學(xué)、食品科學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域,具體應(yīng)用包括:
 
  (1)蛋白質(zhì)二/三級(jí)結(jié)構(gòu)研究。例如,通過(guò)觀察CD光譜中的α-螺旋和β-折疊峰來(lái)表征蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu);同時(shí)可以使用CD技術(shù)在體外研究蛋白質(zhì)的肽鏈停靠點(diǎn)、氨基酸殘基間的鍵合性質(zhì)等也是有幫助的。
 
  (2)納米粒子表面組成分析。研究所需的納米粒子樣品利用CD直接測(cè)量NPs和納米管的官能團(tuán),在構(gòu)建新的智能化復(fù)合材料的時(shí)候研究不同部分之間的作用較為重要。
 
  (3)藥物結(jié)合反應(yīng)研究。CD光譜法能夠追蹤蛋白質(zhì)與化合物的結(jié)合過(guò)程,并對(duì)該過(guò)程進(jìn)行動(dòng)力學(xué)研究。因此,此分析方法對(duì)于細(xì)胞毒素當(dāng)中影響蛋白質(zhì)功能的機(jī)理研究有著非常廣泛的適用性。
 

圓二色發(fā)光光譜儀

 

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